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當前位置:首頁技術文章免疫球蛋白試劑盒復蘇操作流程如下

免疫球蛋白試劑盒復蘇操作流程如下

更新時間:2022-03-22點擊次數:1634
  免疫球蛋白試劑盒復蘇操作流程:
  1.準備工作,開水浴鍋,預熱試劑,超凈工作臺紫外照射30min,找到對應細胞在液氮罐中的位置。
  2.紫外照射后風機吹10min后,酒精擦拭臺面,放入試劑和離心管,取15ml離心管,加入9ml培養液。
  3.在液氮罐中取出細胞,先擰松放液氮,再擰緊,將凍存管放入PE手套中,然后水浴融化后取出,1-2min。
  4.將凍存管噴酒精后放入超凈臺內,擦干管壁,用1ml頭將細胞轉移到已加培養液的離心管中。
  5.800-1000rpm離心5min,注意配平。
  6.將離心好的細胞棄上清,加入5ml*培養基重懸,用移液管吹打8-10次,避免產生氣泡,將細胞懸液接種到10cm培養皿中,補加5ml培養液。
  7.混勻,十字法或者8字法。將混好的細胞放入培養箱中培養。
  免疫球蛋白試劑盒選擇和使用需要注意的問題:
  1.試劑的選擇:選擇優良試劑大家都是知道的,但是在檢測之前還應該提前半個小時將試劑拿到常溫下進行解凍。
  2.加樣中可能遇到的問題:在做血清或是血漿用于檢測試劑的時候,會碰到血清血漿不好分離的情況,這個時候的解決辦法是先放在常溫中1到2小時,然后在進行離心處理。
  3.終止反應:在加終止劑的時候由于傾倒速度快,差生氣泡,造成假陽性結果。所以在倒終止劑的時候要緩慢倒。
  4.顯色問題:使用了過期的顯色劑或者是顯色劑用過后放置時間太長,都有可能造成顯色劑不顯色。所以在進行顯色反應的時候,要先查看顯色劑本身的情況。
  5.洗板時容易造成誤差:因為洗板是人工洗的,所以判斷什么時候洗干凈了也是人為判斷的,這個時候帶有主觀色彩,所以多清洗幾次,還有就是在洗的時候孔與孔之間的液體容易交叉流動。
  6.讀板:讀板的時候首先應該保證板的清潔干凈。
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